第二节 孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查（NIPT与NIPT-Plus）
NIPT产前筛查，是应用高通量测序（NGS技术）的分子遗传技术检测孕期母体外周血中胎儿游离DNA片段，以评估胎儿常见染色体非整倍体异常风险。1997年，卢煜明教授在孕妇血浆中发现了来源于胎盘凋亡细胞的胎儿游离DNA片段，从而为NIPT检测提供了理论基础。母体血浆中的游离DNA为胎儿和母体游离DNA的混合物，随着妊娠期不同，胎儿游离DNA的比例有所变化，最早可于孕4周后检出，绝大部分孕妇在妊娠10周时胎儿游离DNA量可超过4%。通过检测前咨询、样本采集、核酸提取、测序文库制备、文库混合、文库定量、上机测序以及生物信息学分析计算等，得出胎儿患常见染色体非整倍体异常的风险。常见的检测失败的原因主要有胎儿游离DNA浓度过低（＜4%）、建库失败、总游离DNA量过低等。不同平台数据处理过程均有其不同的算法，大多数计算方法是将样本计算结果与整倍体孕妇血浆样本的参考值进行比较，理论上说，所有孕妇人群的参考值是符合正态分布的，如果样本与参考值之间存在显著差异，则说明可能存在非整倍体，比较时需要排除可能的变异因素。
一、NIPT检测的目标疾病
NIPT检测的目标：主要为评估胎儿21三体综合征、18三体综合征和13三体综合征三种常见胎儿染色体非整倍体异常的风险。此外，目前临**应用的无创NIPT-Plus（或称为二代无创），除评估上述三种常见胎儿染色体非整倍体异常外，还可检测其他标准型染色体数目异常（包括性染色体异常），以及多种常见染色体缺失重复综合征的风险。但由于目前积累的数据及可参考的样本有限，其他染色体异常的检出率、假阳性率、假阴性率等尚不明确。
二、检测时间
根据国家卫生计生委办公厅《关于规范有序开展孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查与诊断工作的通知》（国卫办妇幼发〔2016〕45号）建议，本项检测的最佳适宜孕周为12+0~22+6周。孕周小于12+0周，由于孕妇外周血中胎儿游离DNA浓度过低，可能严重影响检测结果的准确性；孕周大于22+6周，如临床确有检测的需要，技术层面仍可行NIPT检测，但后续可能错过最佳产前诊断时间，且大孕周终止妊娠尚存在伦理学的争议。目前临床行NIPT检测一般最晚孕周约32周，考虑到检测时限（通常为7~10个工作日），后续可能无法行产前诊断。孕晚期行NIPT检测需严格把握指征，如孕妇错过最佳筛查时机，而确有胎儿染色体异常高风险者可适用。
三、检测适应范围
除有明确的产前诊断指征，需直接进行产前诊断的孕妇外，所有孕妇均应接受产前筛查，NIPT检测适宜大部分需评估胎儿染色体异常的孕妇，但需重视以下慎用及禁用人群。
（一）慎用人群
有下列情形的孕妇为慎用人群，进行本检测时，检测准确性有一定程度下降，检出效果尚不明确；或按有关规定应建议对其进行产前诊断的情形。包括：
1。早、中孕期产前筛查高风险；
2。预产期年龄≥35岁；
3。重度肥胖（体重指数＞40kgm2）；
4。通过体外受精-胚胎移植方式受孕；
5。有染色体异常胎儿分娩史，但夫妇染色体异常的情形除外；
6。双胎及多胎妊娠；
7。医师认为可能影响结果准确性的其他情形。
（二）禁用人群
有下列情形的孕妇不适用本检测，其检测结果的准确性可能会受到严重影响，包括：
1。孕周＜12+0周；
2。夫妇一方有明确染色体异常；
3。1年内接受过异体输血、移植手术、异体细胞治疗等；
4。胎儿超声检查提示有结构异常，需进行产前诊断的；
5。有基因遗传病家族史或提示胎儿罹患基因病的高风险；
6。孕期合并恶性肿瘤；